微生物实验室质量控制要素

一、质量控制相关定义 （1）质量控制：满足质量要求的操作技术和活动。 （2）质量保证：为了满足实验室质量要求 ，制定相应的计划，实施证明（记录）所进行的一系列的系统活动。 （3）外部质量控制：通过互相校准和/或检验对实验室的操作和结果所进行的控制。 （4）内部质量控制：实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法，对实验室工作的连续性控制计划。 （5）质量手册：是描述质量系统元素的文件或文件的集合。 二、实验室要求 按国家实验室认可的概念，是指一个能够承担法律责任的实体。这里所指的是实验室（微检室）内建立的质量管理的保证体系。人员、房屋、设备满足检测工作需要。 1、人员要求 实验室人员的分类：管理人员、技术人员、人员等。相应岗位的人员，应具备相应的技术能力，相应的技术能力证明（证书及证件）。微生物检验室因有相应技术能力的人负责室内的技术工作，并设立质量监督员。 2、房屋条件要求 房屋要求：具有适宜、足够宽敞、通风有良好的照明。 房屋内墙面及地等应采用易于清洁的材料，保持房间清洁。 房间的设置，以其开展的工作内容加以分用，设立房间。 房间的大小还应根据从事实验人员的进入数量上加以考虑。 3、环境设施要求 房间的温湿度控制与记录（样品存放室）。 特殊环境的微生物指标控制与记录（无菌室等）。 工作室的标准操作规程和定期的检测校准程序（洁净室等）。 特殊环境中的设施质量控制应符合有关要求（净化工作台）。 三、设备控制和程序 微生物检验常用需监控的设备和仪器： 1）培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、 冰箱，（低温冰箱或冷柜）温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。 2）小计量容器。 3）微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪等。 1、高压灭菌锅的温度控制 高压灭菌锅；生物指示菌法（常用）、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。 生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。 高压灭菌锅由专人按作业指导书操作，并做好每一次的作业记录。 高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内的内容物（每瓶内的培养基）不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间不要超过45min。 高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息：高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化（日常常用无菌培养代替）。 高压灭菌锅温度波动范围：110，115和121±2℃。 高压灭菌锅校准周期一般在半年。 2、培养基配制用蒸馏水的控制 对于蒸馏水器来说：按设备说明，定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。 检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率＜0.5ms/m；细菌数＜50cfu/ml。我们日常用的标准为 ＜10ms/m，未见有细菌指标。 检测频率：1次/每月。 蒸馏水定点供应，并做好相应的质量控制，记录检测结果。 3、天平的管理 天平放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。 天平要有使用及运行检查记录。 天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围，一般1次/年进行检定。 运行检查频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出的标准重量单位进行对照。 4、pH计 pH计使用前应用标准液进行校准。 缓冲液使用有效期： PH4.00 约1年 PH7.00 约6个月 pH9.00 约6个月 pH计的维护：电极外表的定期清洗；电极敏感性检测及极性恢复。 5、超净工作台的控制 水平流净化工作台工作区域，要求洁净度为100级。空气沉降30min，细菌数＜1个/皿。垂直流净化工作台，细菌数＜0.49个/皿。 超净工作台运行检查频次：1次/月主要是细菌沉降检测。 净化工作台过滤膜一般为一年更换一次，并同时进行粒子与细菌沉降检测。 6、紫外线灯的控制 检测方法：仪器测试法和生物测试法。前者是通过仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射无1米处，要求其强度为90。 生物测试法：采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射，2min，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。 7、显微镜的控制 显微镜应制定作业指导书，日常维护记录及自校记录。 显微镜应置于无振动，避免灰尘，防潮等要求的环境。 8、其它微生物检测仪器的控制 细菌鉴定仪、酶标仪等设备，工作中常用阳性对照检测其功能正常性。 仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。 仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。 仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格，持证上岗。 四、检测质量保证 定期使用有证标准物质和次级标准物质（参考物质）进行内部质量控制。实验室间的比对或能力验证，利用相同或不同方法进行重复检测，对留存的样品进行在检测。